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T7 Express 感受態(tài)

產(chǎn)品貨號(hào)：CC96159

產(chǎn)品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul

產(chǎn)品價(jià)格： ￥電議

點(diǎn)擊次數(shù)：1278

在線(xiàn)詢(xún)價(jià)

標(biāo)簽：感受態(tài)

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

T7 Express 菌株為大腸桿菌 BL21 增強(qiáng)型菌株，為 Lon 和 OmpT 蛋白酶缺陷型，主要適用于含有 T7

啟動(dòng)子的原核表達(dá)載體(如 pET 等)的蛋白表達(dá)，同樣適用于需要利用大腸桿菌自身 RNA 聚合酶來(lái)

轉(zhuǎn)錄 RNA 的非 T7 啟動(dòng)子的表達(dá)載體（如 pGEX 等）。該菌株區(qū)別于 BL21(DE3)菌株的優(yōu)勢(shì)在于

T7 RNA 聚合酶基因整合在細(xì)菌染色體上的 lac操縱子區(qū)域，基因組中無(wú) λ前噬菌體序列，并具有抗

T1 噬菌體感染等特點(diǎn)。T7 Express 表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC18質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率大于

108 cfu/μg DNA。

產(chǎn)品組成

組分

T7 Express 感受態(tài)細(xì)胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：fhuA2 lacZ::T7 gene1 [lon] ompT gal sulA11 R(mcr-73::miniTn10--TetS )2 [dcm] R(zgb-210::Tn10--

TetS) endA1 (mcrC-mrr)114::IS10

存儲(chǔ)條件

-80 ℃保存；請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質(zhì)量控制

無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留；

化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動(dòng)，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；

5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜。

注意事項(xiàng)

1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用；

2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；

3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率，整個(gè)操作過(guò)程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者：上海語(yǔ)純生物科技有限公司

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